Also Known As
氢氧化钾预试验
真菌涂片
真菌学检测
正式名称
氢氧化钾预试验; 真菌培养; 真菌抗原和抗体检测; Calcofluor荧光增白剂染色
本文最后审核 时间
本文 最后修改 时间 2018/01/20.
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为何检测?

帮助诊断真菌感染,检查为何种真菌感染,有时将分离到的真菌进行药物敏感性实验。

何时检测?

当医生怀疑你有皮肤、肺或者系统性真菌感染时;监测治疗药物的疗效时。

何种样本?

根据感染的部位来采集标本,通常有:皮肤刮屑、指甲和头发标本、体液、血液或活检组织标本。

是否需要做试验前准备?

不需要。

检测什么?

真菌为自然界中存在的微生物,单细胞酵母样或者分枝丝状。环境中有5000多种的真菌,但与人类疾病有关的不到200种,常见导致感染的仅20到25种。

        真菌感染常由一种或几种真菌侵入组织造成,可导致浅部皮肤感染或严重的深部组织感染,血、肺部或全身感染。浅部真菌感染较常见,可导致指甲感染或者发痒红斑的皮肤感染,如众所周知的“脚癣”、皮肤发痒、皮肤癣,或酵母菌感染导致的口腔中的白斑(鹅口疮),或阴道发痒及分泌物增多。根据疾病预防和控制中心(CDC)报道,大约75%的女性一生中至少有一次真菌感染。

        少见情况下,真菌可以从它们最初所在的位置蔓延到或侵入到深部组织,可侵犯机体的任意器官,可能导致严重的肺部感染、败血症或全身性感染。典型的真菌肺部感染通常是由于吸入微小的真菌孢子导致。任何人群都有可能得严重的肺部或全身性真菌感染,但是大多数感染只表现为轻微到中度的流感样的症状。但是免疫缺陷的患者,如HIV/AIDS、器官移植术后,和有基础疾病如糖尿病、肺部疾病等的患者发生严重肺部真菌感染、全身性感染或反复感染的危险性较高。

        真菌检查试验可检测和鉴定真菌,以协助诊断感染并指导治疗。经典的真菌检查试验包括标本涂片显微镜检查,有时用前处理或者染色来帮助检查真菌。镜检可以为真菌感染的诊断提供充分的依据,若为浅部感染,就不需要进行进一步的试验了。但对于持久的、深部的或全身性的等需要明确诊断的感染,还需要进行其它检测,如培养、敏感性试验、抗原和/或抗体试验。

测试样本如何采集?

根据所怀疑的感染部位来采集标本。对于浅部感染,可采取皮肤刮屑、剪下或削下的指甲或头发,用无菌拭子采取阴道分泌物,或者尿标本。对于深部组织、器官或全身性感染,可采取静脉血液标本、来自肺部的痰标本、和/或活检组织标本。若怀疑脑膜炎,可采取脑脊液标本。

是否需要进行任何试验前准备以保证样本的质量?

不需要任何实验前准备。

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常见问题
  • 有何用途?

            真菌检查试验用于检测和诊断真菌感染、协助指导治疗、有时也可用于监测治疗效果。对多数浅部皮肤感染和酵母菌感染,根据临床检查和标本显微镜检查即可诊断是否存在真菌感染,通常不要求把微生物鉴定到种。医生根据实习指南和他的经验进行局部或者口服抗真菌药物治疗。

            真菌培养可用于鉴定侵入深部组织的、感染肺部的、或系统性感染的持久真菌感染中的真菌。许多真菌生长缓慢。特殊营养琼脂能特异性的抑制细菌生长,但必须能支持真菌生长几周。对培养分离到的真菌进行敏感性试验有助于确定治疗采用何种抗真菌药物更有效。

            血液真菌抗原和抗体试验可用于判断患者是否曾患或正患某种真菌感染,较真菌培养更快速,但仅用于特殊真菌的检查,所以医生必须知道试验针对何种真菌。许多人可因既往暴露于真菌而有真菌抗体,因此单次抗体试验并不能说明当前存在真菌感染。若急性期和康复期需要做抗体试验来看抗体水平(滴度)是否改变,其结果的评估需要数周时间。

  • 何时检测?

            医生怀疑患者有真菌感染时可进行真菌检查试验。在采用药物治疗后,医生为评估疗效也可进行检测。对某些患者,需要周期性的检查以监测是否有真菌感染复发。真菌感染的许多症状和体征与细菌或病毒感染相似,故病原菌不明确时可进行真菌检查试验。对浅部感染,当皮肤、指甲或粘膜出现以下症状时需要进行真菌检查试验:

    • 皮肤有发痒、红色、脱屑的区域
    • 指甲变厚、脆弱易碎、和/或变形
    • 口腔中有白色斑点(鹅口疮)
    • 阴道发痒、分泌物增多(酵母菌感染)

            深部及全身性真菌感染因感染部位不同可引起不同的症状,如:

    • 肺部感染会产生流感样症状如咳嗽、发热、肌肉疼痛、头痛、皮疹
    • 血液感染(菌血症)可能引起寒战、发热、恶心、心跳加速
    • 中枢神经系统(CNS)感染(脑膜炎)可引起严重的持久的头痛、颈部僵硬、对光敏感
  • 试验结果的含义?

            浅部感染

            许多浅部真菌感染通过查体就能够诊断。除了通常的症状之外,许多皮肤感染有特有的症状(如感染指甲外观)和感染部位比较典型(如运动员足在脚趾之间)。但临床评估不能确切告诉医生是何种微生物引起的感染。一些实验室检查试验对于真菌感染的检测和确诊以及指导治疗很有帮助,包括:

    Tests for Superficial Fungal Infections

    试验名称e 标本类型e(s) 原理 目的 检测时间
    KOH 压片(氢氧化钾溶液预处理涂片)


     
    皮肤刮屑,头发或指甲断片,组织,阴拭子,体液,痰 氢氧化钾溶液溶解标本中除真菌外的物质。在显微镜下观察标本涂片中是否有酵母样孢子和真菌菌丝(分枝菌丝) 主要用于筛查。可检查真菌但不能说明为何种真菌。 快速
    Calcofluor white 染色 皮肤刮屑,头发或指甲断片,阴拭子,体液,痰 染料能与标本中的真菌成分结合,在紫外光激发下能够发出荧光。在显微镜下观察标本涂片,较肉眼观察敏感性更高。 可检查真菌但不能说明为何种真菌。 快速
    真菌培养 皮肤,指甲,头发,体液 ,组织,阴拭子,痰,血液 标本接种到营养培养基上面或者里面,孵育至标本中有真菌生长。 主要用于真菌感染的诊断。培养真菌以进行鉴定试验及敏感性试验。 数周

            深部及全身性感染

            持久的深部感染或全身性感染,需要更确切的诊断时,需要进行更多的试验来鉴定是何种真菌引起的感染及如何治疗最佳。这些试验通常是多种试验方法联合,包括以上所提及的试验加上以下试验:

    Tests for Systemic Fungal Infections

    试验名称 标本类型(s) 原理 目的 检测时间
    敏感性试验 培养分离到的真菌 继真菌培养后的试验。当病原性真菌被鉴定后,有时进行敏感性试验来确定何种抗真菌药物最有效。 指导治疗 培养后数天或数周
    抗原试验 血液,脑脊液,体液 检测某些特殊真菌的相关蛋白。对多种真菌都可进行此类试验。 诊断特殊真菌引起的感染 数天
    抗体试验 血液,脑脊液,体液 检测特殊真菌引起的免疫反应。可以送检单份标本或是分别采集急性期和恢复期的,即间隔3周的两份标本。 诊断当前或近期由特殊真菌引起的感染;监测治疗 数天或数周
    针对DNA,RNA的分子生物学试验 培养分离到的真菌,血液,脑脊液,体液 检测特殊真菌的遗传物质。 检测某些真菌;并未广泛使用,有的仅在研究机构中使用 数天至数周

            若在真菌压片或Calcofluor white染色中查见真菌成分,则说明标本中存在真菌,但该真菌可能是引起患者症状的致病菌,也可能是皮肤上无害的定植菌。真菌培养中有多种微生生长物,可能说明存在多种致病菌,也可能是致病菌和正常菌群混合在一起。若培养仅有正常菌群生长,那么感染可能为条件致病真菌(正常菌群的一部分)引起,标本中此种病原菌可能被遗漏;此情况也可能有其他原因引起。

            若抗原试验阳性,那么此种真菌很可能是引起患者感染的病原菌。单份血清样本抗体试验阳性只能说明暴露于某种特殊真菌,并不能说明该暴露是何时发生的。急性期和恢复期分别采取的两份血清样本,抗体水平的升高,可提示活动的或新近的真菌感染。一些免疫系统受损的患者感染时,抗体水平常低于预期值。

            若标本中未查到真菌,可能为患者没有真菌感染,也可能为此份标本或此次试验未查到病原菌。

  • 还有什么我需要了解的吗?

    真菌感染常常需要与其他微生物引起的感染相区分,如细菌感染。某些感染病例,真菌和细菌都存在。需要一些试验来进行鉴别诊断:

    • 革兰染色 - 用显微镜检测标本中的细菌和/或真菌的一种快速试验
    • 细菌培养 - 用于排除细菌感染或确定是否合并有细菌感染
    • 抗酸杆菌涂片和培养–怀疑分枝杆菌感染如结核病
    • 血培养 – 怀疑为菌血症

            真菌在潮湿的环境中生长旺盛,如公共游泳池和体育馆的储物柜,有汗的鞋子、紧身衣服和皮肤皱褶里。可以通过穿拖鞋或凉鞋以减少直接暴露,勤换袜子,烘干鞋子,保持身体易潮湿的部位干燥清洁等来减少皮肤真菌感染的机会。

  • 我持续咳嗽、发热,医生为什么问我去过何地旅游及参加过什么活动?

            一些真菌仅在特定的地理位置出现,如美国的西南部或美国中西部。如果您曾挖掘洞穴或进行洞穴探险,您可能会暴露于真菌孢子。尽管没有近期旅游,也有可能是被感染。一些由真菌引起的肺部感染可能在暴露后数月甚至数年才显现出来。(更多相关内容参见 旅游者疾病Traveler’s Diseases)

  • 医生怀疑我可能是真菌感染,为什么还要做结核检查试验?

            肺部真菌感染相关的许多症状和体征也可以由结核感染引起。通常医生可能会进行结核检查试验(如抗酸杆菌涂片和培养)已排除分枝杆菌感染。这两种微生物生长都很缓慢(无论在体内还是在实验室中)。

  • 为什么医生采集多份标本?

            多份标本采集用于评估感染扩散的深度,也有时用于增加真菌检出率。

  • 真菌感染如果不治疗,会自愈么?

            有些可能会,但是大部分不治疗会持续存在。肺部和全身性真菌感染进展较为严重,甚至症状并不很严重时可能已经导致器官和组织永久性的损伤。一些深部感染如果不治疗几乎都可致命。

  • 是否必须要持续治疗很长一段时间?

            是的。即使您已开始感觉好一些一段时间了,您仍应该听从医生的建议。虽然有些真菌感染在数天至数周内就会复发,但某些真菌感染需要数月甚至数年的持续治疗。

参考文献

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